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緩沖溶液的配置及原理有哪些注意事項
以下是緩沖溶液配置及原理的關鍵注意事項總結,本生結合技術規范與常見問題解決方案:
一、緩沖溶液選擇原則?
pKa匹配?
緩沖對的pKa值應接近目標pH(理想差值≤1),如PBS緩沖液(pKa2=7.21)適用于pH7.0±0.2?。
弱酸/堿濃度比建議1:1(如醋酸-醋酸鈉緩沖對pKa=4.75)?。
濃度控制?
總濃度通常為0.1-0.2M,過高可能影響離子強度,過低則緩沖能力不足?。
二、配置操作要點?
試劑處理?
磷酸鹽等試劑需110-130℃烘干2-3小時去除結晶水?。
使用電子天平精確稱量(<0.1mg)?。
溶解與定容?
先溶解主鹽(如Na?HPO?),再調節pH至目標值?。
定容后需用pH計校準(如pH6.86標準緩沖液需6.80-7.00)?。
pH調節?
禁止直接加強酸/堿調節,應通過共軛酸堿比例調整(如用NaOH中和醋酸)?。
三、常見問題與解決方案?
問題? ?原因? ?解決方案?
緩沖能力不足 濃度過低或pKa不匹配 重新計算比例或提高總濃度?
pH值漂移 揮發組分損失(如NH?) 密封避光保存,現配現用?
沉淀生成 離子濃度超限(如Ca2?干擾) 使用去離子水并過濾?
四、特殊應用注意事項?
HPLC流動相?
緩沖液需色譜級超純水配制,避免顆粒物堵塞系統?。
預混合流動相,避免泵內混合不均導致保留時間波動?。
生物實驗?
避免含金屬離子(如Mg2?)干擾酶活性?。
滅菌后需驗證pH穩定性(如121℃高壓滅菌20分鐘)?。
注:不同緩沖體系參數可能差異較大,建議以實際實驗需求為準。
注:僅供科研使用,以上資料供參考,如需具體產品說明請咨詢技術老師或品牌供應商。
緩沖溶液 本生一直視質量控制為企業的生命,追求企業競爭力的不斷提升。公司在經營中始終秉承:遵紀守法,嚴于律己,寬仁以待,敢于承擔的企業精神作為標準,以過硬的質量和優良的服務來維護和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發展目標,本生,您信任的合作伙伴!本生試劑盒
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