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    以下是關于植物海藻糖-6-磷酸(T6P)ELISA試劑盒說明書的核心內容整理

    更新時間:2025-05-15    點擊次數:791

      以下是關于?植物海藻糖-6-磷酸(T6P)ELISA試劑盒說明書?的核心內容整理:

      BS-8050 植物海藻糖-6-磷酸(T6P)ELISA試劑盒 天津本生

      實驗原理?

      采用雙抗體夾心法(或一步夾心法)檢測T6P濃度:

      包被抗體?:微孔板預包被T6P特異性抗體。

      反應體系?:依次加入樣本、標準品和HRP標記檢測抗體,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物。

      顯色與檢測?:TMB底物在HRP催化下顯色(藍色→黃色),450nm波長測定OD值,濃度與吸光度正相關。

      試劑盒組成?

      組分 96孔配置(示例) 備注

      微孔酶標板 12孔×8條 預包被抗體

      標準品 0.3mL×6管 濃度梯度:0-80 μg/L或0-12 ng/mL

      HRP檢測抗體 6mL(或10mL) 需避光保存

      TMB底物(A/B) 各6mL 現配現用

      終止液 6mL(2M硫酸) 顯色終止

      20×洗滌緩沖液 25mL 使用前1:20稀釋

      樣本處理要求?

      樣本類型?:植物組織勻漿、細胞上清液等,避免含疊氮鈉(HRP抑制劑)。

      預處理?:1000×g離心20分鐘取上清,分裝后-20℃保存,避免反復凍融。

      操作步驟?

      平衡試劑?:使用前室溫平衡20分鐘,預冷組分需溶解。

      加樣與孵育?:

      標準品孔加入梯度濃度標準品,樣本孔加入待測液(建議復孔)。

      37℃孵育60分鐘,洗板5次(手工或自動洗板機)。

      顯色與終止?:

      每孔加入TMB底物,避光反應15分鐘。

      加入終止液后15分鐘內測定OD450值。

      注意事項?

      質量控制?:S0標準品作為陰性對照,樣本濃度需乘以稀釋倍數。

      保存條件?:未使用板條需密封保存于4℃,試劑盒有效期通常為6個月(2-8℃)。

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